???? 染色質免疫沉淀技術(Chromatin immunoprecipitation assay, ChIP):是一種研究體內(nèi)轉錄因子與基因組DNA之間互作結合的方法。基本原理是活細胞狀態(tài)下,通過多聚甲醛固定,形成蛋白-DNA復合物,運用超聲(或酶解)方法對染色體隨機剪切至一定長度范圍,通過免疫共沉淀富集結合,純化獲取轉錄因子蛋白所結合的啟動子區(qū)域片段,后續(xù)產(chǎn)物可用于Q-PCR檢測驗證或測序分析。
技術原理:
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技術服務流程:
1.細胞交聯(lián)固定:多聚甲醛固定活細胞(或組織)
2.核質分離:提取細胞核,獲取染色質
3.超聲破碎:超聲斷裂染色質,獲取一定范圍長度的片段
4.免疫共沉淀:獲取DNA與蛋白結合的特定復合物
5.解交聯(lián):解除DNA與蛋白的交聯(lián)狀態(tài),純化獲取DNA產(chǎn)物
6.Q-PCR檢測或建庫測序
服務優(yōu)勢:
1.生物信息學方法,預測轉錄因子蛋白結合的啟動子基因,以及預測結合的特定motif,為客戶提供多選擇信息
2.直接尋找轉錄因子結合的編碼區(qū)上游靶基因,精準定位調控基因
3.設置完整組別,包括Input組,陽性組,對照組,陰性組,實驗更加嚴謹可靠
4.提供可直接用于文章的標準結果圖,以及實驗原圖結果
5.提供完善的實驗報告,更利于文章的撰寫和申請
適用研究:
1.適用于人,大鼠,小鼠等哺乳動物細胞的研究,探討與驗證體內(nèi)轉錄因子蛋白調控啟動子的關系
2.適用于臨床各種組織樣品的探討研究,例:癌組織與癌旁組織,通過ChIP實驗獲取得到的樣品產(chǎn)物DNA,建庫測序獲取調控的啟動子基因
客戶提供:
1.IP或ChIP級抗體,抗體量>20ug
2.活細胞:1-2*10^7
3.新鮮組織:組織量>0.1-0.3g
4.驗證基因信息
輝園苑提供:
1.WB檢測抗體效價與特異性結果圖
2.染色體斷裂圖
3.完整實驗報告
4.可直接用于文章使用的處理結果圖